如何一本正经地玩坏ceRNA机制

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来源：互联网
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2019-01-28
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　　还有性的siRNA siR-Tiger，其可以降解lncRNA lnc-Tiger，而lnc-Tiger促进了母老虎虐待症的症状，临床试验表明：这款护肤霜果然在表型上了母老虎症的表型，使女朋友喵属性回归，可爱温柔，上得厅堂，下得厨房，再也没出现过吵架、掐胳膊、踢腿、揪耳朵的表现型(Phenotype)。

　　我们的志愿者，机智的怪阿姨，参与了真人临床测试，我们大家都表示：效果很明显，实验室的气氛和谐了很多。

　　那么咱们就来一起回顾一下，这款产品诞生的整个过程，充满了发散的逻辑思维方式、创新的科学问题探索以及严谨的机制研究。

　　母老虎虐待症(Wife Tigerosis，WT)一直以来是困扰全世界老公的女性疾病之一，由于发病率和老公受伤率较高，母老虎虐待症极大着老公们的健康，WHO甚至把母老虎虐待症列为仅次于心血管病的第二大疾病。调查显示，中国按地区不同，20~40岁女性的发生率平均为30%，发病率极高。2005年美国因为母老虎虐待症导致的损失、身体的医疗费用至少造成169亿美金的损失，预计到2025年这一损失将会达到253亿美金，另据数据披露，2009年中国约4000万女性患有母老虎虐待症，25~35岁以上女性在其中所占的比例将近80%，预计到2050年，中国患有母老虎虐待症的女性将达到2.12亿。

　　小张团队从事母老虎虐待症(WT)研究多年，有比较丰富的科研经历，已有多篇SCI发表，总的影响因子累计已达70.6分。

　　首次发现母老虎蛋白(Tiger)，全长438个氨基酸，由第24号染色体上基因TIGER并翻译表达，证明其表达直接参与了母老虎虐待症的发病过程，研究发表在了《Women in Marriage》(IF=30.5)

　　在后续的研究中小张团队再次发现了一个命名为miR-cat的miRNA，生信分析发现其与Tiger mRNA有多个结合位点，后续的Q-PCR、WB、敲减实验、荧光素酶报告系统，均证明miR-cat结合Tiger mRNA，降解该mRNA，下调母老虎蛋白的表达，母老虎虐待症状也得到改善，研究发表在了《Girl》(IF=40.1)

　　那么miR-cat的表达是不是也有调控机制呢？是否和lncRNA有关系呢？还真被X湿兄发现了，科研思和实验过程如下：

　　lncRNA芯片分析：分别取老婆温柔乖巧时期、母老虎症发病时期的血细胞，做芯片差异分析，发现了5条lncRNA表达量上升了10倍，而有条lncRNA，lnc-Tiger表达量上升了33倍。

　　生信分析：经过结合序列的分析，lnc-Tiger和miR-cat有多达5个结合位点。

　　细胞功能试验：分别对lnc-Tiger进行过表达和敲减实验，发现其表达量与miR-cat的表达量呈现负相关，而和Tiger蛋白的表达量呈正相关。

　　细胞表型验证：lnc-Tiger过表达的细胞株，行动力更强，经常无缘无故暴走，如下图

　　lncRNA的胞内定位：X湿兄设计了针对lnc-Tiger的荧光探针，FISH技术发现lnc-Tiger位于胞质内，作者怀疑是ceRNA机制

　　lnc-Tiger和miR-cat结合实验：荧光素酶报告系统，验证了确实是ceRNA机制

　　母老虎虐待症雌性大鼠模型建造：lnc-Tiger过表达后，雌性大鼠明显懒了很多，占着食槽不让雄大鼠吃，还让雄大鼠整天整理垫料，保持整洁，另外还发现了雄性大鼠身上有多处掉毛和抓痕，状态也变得很差，睡眠不足；而lnc-Tiger被siRNA-Tiger沉默的雌性大鼠，其笼内的雄性大鼠生活状态异常良好。